無血清培養基的優缺點
無血清培養基的優點:
1.可避免血清批次間的質量變動,提高細胞培養和實驗結果的重復性。
2.避免血清對細胞的毒性作用和血清源性污染。
3.避免血清組分對實驗研究的影響。
4.有利于體外培養細胞的分化。
5.可提高產品的表達水平并使細胞產品易于純化。
6.組分穩定,可大量生產。
7.不含有絲分裂原抑制劑,可以促進細胞增殖。
無血清培養基的缺點:
1.細胞在無血清培養基中易受某些機械因素和化學因素的影響,培養基的保存和應用不 如傳統的合成培養基方便。
2.成本較高。
3.針對性很強,一種無血清培養基僅適合某一類細胞的培養。
4.處于發育的不同分化階段的細胞(例如干細胞與定向前體細胞相比)需要不同的配方,對生長因子和細胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時,也去除了一些血清蛋白具有的保護、解毒作用,因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。
目前,無血清培養基的研究有兩個方向:一是培養基中不含有任何動物來源的添加組分;二是培養基中不含有不明確的添加組分。依此可以將當前應用較多的無血清培養基歸納為以下四種:
1.一般意義上的無血清培養基,用各類可代替血清功能的生物材料配制細胞培養基,如牛血清白蛋白(BSA),轉鐵蛋白,胰島素等生物大分子物質,以及從血清中提取的去除蛋白質的混合脂類以及水解蛋白等。其特點是培養基中的蛋白含量較高,添加物質的化學成分不明確,其中含有大量的動物來源蛋白。
2.無動物來源培養基:許多商業公司開發的無動物來源培養基是基于生產重組藥物的安全考慮,培養基中的添加組分無動物來源,需要的蛋白來源于重組蛋白或者蛋白水解物,這些組分可以保障細胞生長及增殖的需要。
3.無動物蛋白培養基:培養基*不用動物來源的蛋白,但仍有部分添加物是來源于植物蛋白的水解片段或合成多肽片段等其他衍生物。此類培養基組分相對穩定,但必須添加類固醇激素和脂類前體,并且對培養的細胞是高度特異性的。
4.化學組分限定培養基,此類無血清培養基是目前zui安全的,zui為理想的培養基,首先可以保證培養基批次間的一致性,其中所添加的少量動物來源的蛋白水解物、蛋白都是成分明確的組分。其特點是培養基的性質確定,配起培養基來也比較方便。